獼猴桃潰瘍病病原菌的檢測及花粉消毒技術的研究 作者：曹凡
獼猴桃潰瘍病(kiwifruit bacterial canker)是獼猴桃產(chǎn)業(yè)爆發(fā)的細菌性病害，病原菌為丁香假單孢桿菌獼猴桃致病變種(Pseudomonassyringae pv.actinidiae,Psa)。Psa寄主范圍廣，危害嚴重。陜西作為中國獼猴桃最大種植區(qū)，近年來由于獼猴桃植株感染Psa日趨嚴重，影響果實品質(zhì)與商品性。Psa的早期診斷、早期預防是預防大面積爆發(fā)Psa的前提，近年來的研究表明，獼猴桃花粉能被Psa感染，花粉已成為Psa國內(nèi)各獼猴桃產(chǎn)區(qū)及國際獼猴桃產(chǎn)區(qū)間遠距離傳播的重要原因。因此，對花粉中Psa準確、快速檢測及消毒是控制花粉傳播Psa的關鍵，也是減少獼猴桃Psa大面積爆發(fā)的有效措施。
本研究采用以Gallelli檢測法為基礎改進的巢式PCR方法對陜西眉縣、周至的獼猴桃枝條、葉片及雄花進行Psa檢測，驗證該方法的準確性；用Kanr-Psa染菌花粉，并用不同濃度的臭氧處理花粉，檢測臭氧對花粉中Kanr-Psa殺滅率及花粉生活力的影響，并將臭氧處理的花粉授粉進行田間應用，調(diào)查獼猴桃果實產(chǎn)量指標，從而建立獼猴桃花粉Psa快速檢測、消毒技術體系，為控制花粉傳播Psa提供技術支撐。
▲陽光金果G3獼猴桃
主要研究結(jié)果如下：一、獼猴桃植株中Psa的巢式PCR檢測采摘陜西眉縣、周至獼猴桃樣品，挑選60個有Psa典型癥狀和60個無Psa典型癥狀的枝條、葉片、雄花各20個進行檢測，結(jié)果表明：60個有Psa典型癥狀的樣品陽性率為76.67%，其中雄花Psa的陽性率為55%；60個無Psa典型癥狀的樣品中陽性率為41.67%，其中雄花Psa的陽性率為50%。無Psa典型癥狀的陽性結(jié)果全部測序分析，發(fā)現(xiàn)陽性樣品均為Psa。
（獼猴桃花粉生產(chǎn)過程）
二、不同濃度臭氧處理對染菌于獼猴桃花粉中Kanr-Psa殺滅效果及花粉生活力的影響將Kanr-Psa染菌于花粉中，選用不同濃度的臭氧處理花粉30min，結(jié)果表明：花粉中Kanr-Psa的殺滅率隨臭氧濃度的升高而增大，濃度為1000mg/m3時，殺滅率可達到98.84%，說明臭氧對獼猴桃花粉中Kanr-Psa的殺滅效果比較好。離體萌發(fā)法的檢測結(jié)果表明：花粉的生活力隨著臭氧濃度的增大而降低，濃度為600mg/m3時，花粉生活力下降，有顯著性差異(p≤5%)，以1000mg/m3對花粉的生活力影響最大，比ck組下降13.49%。
▲獼猴桃花粉滅菌方法滅菌率及對花粉活性的影響
三、不同濃度臭氧處理獼猴桃花粉中Psa授粉對獼猴桃產(chǎn)量的影響獼猴桃果實座果率、總重量、單果重、果形指數(shù)及種子數(shù)等指標統(tǒng)計結(jié)果表明：臭氧濃度為600mg/m3時，與ck組的座果率相比無顯著性差異，1000 mg/m3的濃度影響最大，分別下降15.40%、16.40%和18.52%，且畸形果有增加的趨勢。生產(chǎn)上應選擇對獼猴桃性狀影響比較小的臭氧濃度消毒，以600mg/m3為宜。
▲獼猴桃花粉滅菌方法滅菌率及對花粉活性的影響
綜上所述，本研究結(jié)果表明：以Gallelli檢測法為基礎改進的巢式PCR方法可用于陜西眉縣、周至的獼猴桃枝條、葉片及雄花Psa檢測，雄花中Psa陽性率為52.5%，用臭氧進行獼猴桃花粉中Psa消毒適宜的條件為600 mg/m3：該處理殺菌率可達90.77%，對花粉活力僅下降9.66%，對獼猴桃果實座果率、總重量、單果重和種子數(shù)分別下降7.56%、0.76%、0.76%和8.9%。
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▲獼猴桃花粉
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